近年來屢屢出現在食品中非法添加合成色素事件，合成色素日益成為影響食品安全的一個重要因素。這類色素的合成要經過磺化、硝化、鹵化、偶氮化一系列化學反應， 大多對人體

有一定危害作用， 偶氮類合成色素更具有致癌性。我國對于莧菜紅、胭脂紅、誘惑紅、日落黃、檸檬黃、亮藍、靛藍這幾類合成色素在食品中的使用有著嚴格的限量。誘惑紅是偶氮類化合物， 因此準確測定食品中的誘惑紅對于食品安全有著重要意義。

   目前測定誘惑紅的標準有高效液相色譜法、紫外可見分光光度計法、示波極譜法等。常用的是高效液相色譜法和紫外可見分光光度計法，本文研究兩種方法的優(yōu)劣，以期找到可以高效準確測定誘惑紅的檢測方法。

   主要儀器：

   高效液相色譜儀(配有紫外檢測器; 色譜柱: C18 250mm×4.6mm粒度5μm)

   紫外可見分光光度計（上海光譜儀器有限公司）

   分析天平(精確到 0.0001g) （上海菁海儀器有限公司）

   離心機、實驗室用水均為超純水。

   人工合成色素誘惑紅標準溶液，聚酰胺粉，乙醇－氨溶液，甲醇－甲酸溶液，檸檬酸溶液，乙酸，甲醇(色譜純)，乙酸銨。

   液相色譜條件：流速: 1.0 mL/min；柱溫:30℃；進樣量:10μL；梯度:甲醇20%～35%，3% /min；35%～98%，9%/min；98%～98%，繼續(xù)6min；檢測波長:254nm；流動相:甲醇－乙酸銨溶液

(0.02mol/L)。

   高效液相色譜法：將水果味糖果粉碎準確稱取10g，加30mL乙醇－氨溶液溶解，水浴濃縮至 20 mL，加20%檸檬酸調節(jié)pH3.5～4.5，加熱至70℃，加0.8g聚酰胺粉，充分攪拌，用20%檸檬酸調節(jié)pH3.5～4.5，加入少量水，使色素完全吸附。3000r/min離心3min。以乙醇－氨溶液解析， 加乙酸中和，定容至 100mL。經0.45μm濾膜過濾后，吸取10μL進樣。

   紫外可見分光光度計法：將水果味糖果粉碎準確稱取10g，加30mL溫水溶液溶解，用檸檬酸調節(jié)至pH4，加0.8g聚酰胺粉，充分攪拌，使色素完全吸附。熱水洗去糖等物質。并用甲醇 － 甲酸溶液洗三次，去除天然色素。再用70℃ 水洗至濾液為中性。然后用乙醇－氨溶液將合成色素解析下來。于水浴上驅除氨，將溶液蒸至2 mL，用50% 的乙醇溶液定容至5mL。

   從結果的可信度來看， 高效液相色譜法加標濃度在300μg/g時，平均回收率為98.3%，符合《SN/T1743－2006食品中誘惑紅、酸性紅、亮藍、日落黃的含量檢測 高效液相色譜法》中的回收率要求；紫外可見分光光度計法的兩個相差最大的平行試樣測定結果( 即0.0311和0.285) 的絕對差值是算術平均值的8.7%符合《GB/T5009.141－2003食品中誘惑紅的測定》的要求。

   從精密度來看， 高效液相色譜法的六個平行試樣測定結果的 RSD=0.7% ，紫外可見分光光度計法的六個平行試樣測定結果的 RSD=4.1%，可見此實驗中高效液相色譜法的精密度明顯高于紫外可見分光光度計法。

   從方法的靈敏度來看，高效液相色譜法的檢出限是2.5mg/kg；紫外可見分光光度計法的取樣量為10g時，檢出限是25mg/kg。可見高效液相色譜法的靈敏度明顯低紫外可見分光光度計法。

   由上述可以得出，在檢測糖果中合成色素誘惑紅含量時，高效液相色譜法優(yōu)于紫外可見分光光度計法。